区别：

1、Assembly.LoadFile只载入相应的dll文件，比如Assembly.LoadFile("a.dll")，则载入a.dll，假如a.dll中引用了b.dll的话，b.dll并不会被载入。

Assembly.LoadFrom则不一样，它会载入dll文件及其引用的其他dll，比如上面的例子，b.dll也会被载入。

2、用Assembly.LoadFrom载入一个Assembly时，会先检查前面是否已经载入过相同名字的Assembly，比如a.dll有两个版本(版本1在目录1下，版本2放在目录2下)，程序一开始时载入了版本1，当使用Assembly.LoadFrom("2\\a.dll")载入版本2 时，不能载入，而是返回版本1。

Assembly.LoadFile的话则不会做这样的检查，比如上面的例子换成Assembly.LoadFile的话，则能正确载入版本2。